上一篇我们为大家介绍如何复苏ATCC细胞，这次该轮到菌株了。ATCC的菌株有冻干粉和冰冻两种形式。千里之行始于足下。如何正确的复苏就是成功的关键，小编今天就和你仔细唠一唠。

复苏冰冻的细菌

1.先准备好细菌培养的无菌试管，及产品说明书推荐的相应细菌培养基。在试管中装入适量配好的培养基，并置于培育箱以平衡温度和pH值。

2.将冻存管置于水浴中并轻微的搅拌以帮助解冻。水浴温度设定与该细菌的培养温度一致。解冻过程应该尽快，大约2分钟或待最后一块小冰晶体刚融化，就应将细菌冻存管取出水浴。

3.在从水浴中取出的冻存管表面喷洒70%乙醇配制的消毒剂，用无菌纸巾或纱布试干。之后的操作步骤都应该遵循在无菌条件下严格操作。

4.小心拧开冻存管的顶部，将管内容物用移液枪转移到含适量培养基的无菌培养试管。可制备额外的培养试管。从第一个培养接种管中取0.5毫升混匀的培养物，转移到其他备好的培养试管。

5.在产品说明书推荐的适当温度和条件下进行细菌培养。

6.在产品说明书推荐的培养时间下观察细菌的生长状况。不同细菌菌株的具体培养时间会有不同，请依照产品说明书列出的细菌培养条件和时间。(请参阅:*注1)

复苏冻干的细菌

1.使用吸管或移液枪,在无菌冻干物中加入0.5毫升备好的产品说明书所推荐的生长培养基。混匀。

2.将全部混合物转移到装有5到6毫升培养基的无菌培养试管中。此外，滴入几混合物到琼脂培养皿斜面作培养。

3.可制备额外的培养试管。从第一个培养接种管中取0.5毫升混匀的培养物，转移到其他备好的培养试管。在产品说明书推荐的适当温度和空气条件进行细菌培养。

4.在产品说明推荐书的培养时间下观察细菌的生长状况。不同细菌菌株的具体培养时间会有不同，请依照产品说明书列出的细菌培养条件和时间。大部分细菌在几天内会从冻干状态复苏生长。(请参阅:*注1)

*注1:从冷冻或冻干状态恢复，某些细菌菌株可能会出现较长时间的迟滞期。这些菌株可能需要延长培养时间。

*注2: ATCC的冻干粉有安瓿瓶和西林瓶多种包装。想知道如何打开安瓿瓶，请戳 论安瓿瓶的正确打开方式

ATCC迷你包装

ATCC部分产品提供方便、一次性使用的“迷你”规格包装，每个包装管中含有可立即使用的甘油冷冻保存菌株，可以节省您宝贵的时间和资源。

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